采用純培養(yǎng)方法對玻利維亞進口商品鹽樣品的嗜鹽微生物進行分離培養(yǎng),通過 16S rRNA 基因的測序和序列相似性分析,確定所分離菌株的分類地位。在此基礎(chǔ)上,對該樣品中的嗜鹽微生物群落組 成和物種多樣性進行系統(tǒng)研究,并且選取部分代表菌株進行胞外酶活及拮抗作用測定。恒溫培養(yǎng)箱、恒溫震蕩培養(yǎng)箱,上海一恒科學(xué)儀器有限公司; PCR 儀,北京東勝創(chuàng)新生物科技有限公司; 電泳儀,北京六一生物科技有限公司; 凝膠成像系統(tǒng),上海天能公司; 臺式高速離心機,湖南湘儀離心機儀器 有限公司; YXQ-75SII高壓蒸汽滅菌鍋,上海博迅醫(yī)療生物儀器股份有限公司。
在不同 pH 條 件下從玻利維亞商品鹽樣品中分離得到的優(yōu)勢物種不 盡相同。在 pH 為 7. 5 和 8. 5 的培養(yǎng)基分離的嗜鹽古菌 中,分別有 107 株、30 株來自 Halobacterium 屬,分別占所 分離菌株的 56. 9%、58. 8%,說明 Halobacterium 屬菌株玻利維亞商品鹽可培養(yǎng)嗜鹽古菌組成( 屬級水平) Fig.3 Composition of cultivable halophilic archaea from commercial salt of Bolivia ( genus level) 注: 不同顏色代表不同屬嗜鹽古菌,色塊高度代表該屬占比。 為該 pH 生境中的優(yōu)勢物種 。在 pH 為 9. 5 的條件下共分離到 9 株嗜鹽古菌,其中有 7 株來自 Natrialba 屬,占比 77. 8%,說明 Natrialba 屬菌株為 嗜鹽嗜堿類群,也成為較高 pH 條件下的優(yōu)勢物種 。而在 pH 為 8. 0 和 9. 0 的培養(yǎng)基中,嗜鹽 古菌種類分布較均勻,優(yōu)勢種的優(yōu)勢地位并不明 顯: 在 pH8. 0 條件下 Halobacterium 屬菌株最多,有 42 株,占比 21. 5%; 在 pH9. 0 條件下 Halopenitus 屬 菌株最多,有 22 株,占比 35. 5% 。玻利維亞安第斯山脈附近分布有眾多的高鹽環(huán)境,其中鹵水型礦床形成于封閉匯水盆地內(nèi),多以鹽湖的 形式露出于地表。